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本试剂盒是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞，可用于PAGE、Western Blot、免疫沉淀(IP)和Pull down等实验研究。试剂盒主要成分为Tris、NaCl、Np-40以及多种蛋白酶和磷酸酶抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。每次可以处理10⁷个细胞或100mg组织，可以使用10次。

• 进行裂解时如果有必要，请加入所提供的蛋白酶和磷酸酶抑制剂，否则蛋白质容易降解或蛋白质的磷酸化被破坏。
  
• 该产品裂解的蛋白样品含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法做定量，建议使用BCA蛋白质定量检测试剂盒(货号：GS1480)或改良型Lowry法蛋白浓度测定试剂盒(货号：GS1487)测定蛋白浓度。
  
• 在细胞裂解时，如果在进行细胞裂解步骤4前裂解液比较粘，可以先超声以剪断基因组，再离心取上清。
  
• 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
  
• 使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
  
• 本试剂只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。

• 培养细胞裂解
  
  • 对于贴壁细胞，去除培养液，用1X PBS洗一遍。对于悬浮细胞，离心收集，用1X PBS洗一遍。
    
  • 通常每10⁷个细胞或100mm培养板或150cm²培养瓶，可加1mL溶液A、1μL溶液B和5μL溶液C，裂解液和细胞应充分接触混匀。
    
  • 冰上静置5～10min，为促进细胞裂解，可用枪头轻轻吹打，轻轻倾斜培养皿使裂解产物流向瓶皿的一边或一角，然后将之转移到1.5mL离心管中，在冰上静置10min，期间剧烈振荡30sec或超声破碎细胞，每次10sec，2～3次，每次间隔5sec，置于冰上冷却，超声破碎细胞后应镜检，细胞破碎率不小于90%。
    
  • 转置冷冻离心机中，4℃，12000rpm(12830g)，离心5min，取上清，即可进行后续的电泳、Western或免疫沉淀等实验操作。
• 组织裂解
  
  • 将组织剪切成细小的碎片，向每100mg组织中加入1mL溶液A、1μL溶液B和5μL溶液C混匀，置玻璃匀浆器冰上均质30～50次，待组织已经完全裂解，没有明显的小组织块即可。
    
  • 将匀浆物转移到1.5mL离心管中，在冰上静置10min，期间剧烈振荡3～4次。
    
  • 转置冷冻离心机中，4℃，12000rpm(12830g)，离心5min，取上清，即可进行后续的电泳、Western或免疫沉淀等实验操作。